液相色谱巧辩赤潮毒素

原甲藻、亚历山大藻藻毒素的检测是国家973项目“我国近海有害赤潮发生的生态学、海洋学机制及预测防治”中的关键检测项目，以往均无较好的方法进行检测，海洋所所级中心通过对Oshima分析方法进行改进，重组洗脱液，改进对GTX毒素的分离，实现了分离六种GTX毒素和三种STX毒素，为该973项目的完成提供了技术保障。

原Oshima分析方法GTX1，4之间以及GTX 2，3之间分离效果不理想，也无法分离出dcGTX毒素，只能采用另外一种流动相用来再次进液相色谱分析来分离dcGTX，造成时间和成本的浪费。通过实验发现洗脱液A中离子对浓度降低可以有效改进毒素的分离效果，但是离子对浓度和有机改良剂浓度必须控制在合适的水平上，因为离子对浓度的降低能够导致毒素保留时间的急剧降低，因此必须同时降低洗脱液中的有机改良剂的浓度；而且GTX1-4与dcGTX相比，对离子对浓度和有机改良剂浓度的改变表现出不同程度的保留时间变化，在离子对浓度相对稳定的条件下，GTX1-4比dcGTX更易受有机改良剂四氢呋喃浓度变化的影响。因此必须选择合适的离子对浓度和有机改良剂含量，才能得到较好的分离效果。

改进后系统所用的洗脱液A为40mmol/L磷酸氨缓冲液其中含有5.5mmol/L的离子对试剂辛基磺酸钠，PH= 6.9,最后在体系内加入0.5%的四氢呋喃；洗脱液B为50mmol/L磷酸氨缓冲液，其中含有13mmol/L离子对试剂辛基磺酸钠，PH=6.9，最后在体系内加入1.8%的四氢呋喃和18%的乙腈。

图1 六种GTXs毒素标准色谱图

图2 三种STXs毒素标准色谱图

改进后的方法GTX毒素的分离效果有了明显改善，同时与原来的分析方法相比，对GTX毒素的分析检出限也略有降低，可以满足对毒素组成的分析要求。

表1 改进后的赤潮毒素检出限与灵敏度